深圳地区G6PD缺乏症大规模基因突变谱筛查项目顺利完成

　　G6PD缺乏症，俗称蚕豆病，是由于编码红细胞中葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）的基因突变，导致该酶活性降低，红细胞不能抵抗氧化损伤而遭受破坏，引起溶血性贫血的一种遗传性酶缺乏病。中国是本病的高发区之一，呈南高北低的分布特点，患病率为0.2%-44.8%。患者主要分布在长江以南各省，以海南、广东、广西、云南、贵州、四川等省为高。

　　G6PD缺乏症临床表现与一般溶血性贫血大致相同，分先天性非球形红细胞溶血性贫血、新生儿黄疸、蚕豆病、药物性溶血、感染诱发溶血等类型。常因食用蚕豆、服用或接触某些药物、感染等诱发血红蛋白尿、黄疸、贫血等急性溶血反应。严重的急性溶血性贫血如不及时处理，可引起肝、肾、或心功能衰竭，甚至死亡。患G6PD缺乏症的新生儿中，约50%的患儿会出现新生儿黄疸，其中约12%可发展为核黄疸，最终损伤大脑，导致智力低下。本病遗传方式为X连锁不完全显性遗传，男性发病高于女性，一些女性杂合子酶活性可能正常。编码G6PD的基因位于X染色体的长臂2区8带，是一个典型的管家基因。该基因突变类型以点突变为主，在中国人群中，最常见的三种突变是G1388A、G1376T、A95G。

　　目前G6PD缺乏症的临床诊断主要依靠酶活性检测法，有高铁血红蛋白还原法、G6PD/6PGD比值法等。由于女性杂合子的G6PD活性往往是正常或处于临界值，现有的临床检测方法对女性杂合子的检测存在漏诊现象。因此建立一种更加高效准确的G6PD缺陷筛查方法，对于优生优育、预防出生缺陷极为重要。

　　我中心分子医学实验室与原深圳市罗湖区计生中心、原龙岗区计生中心合作，历时两年，对6389名参与孕前优生惠民工程免费孕前体检的育龄男女，开展了ARMS-PCR法结合NGS序列分析方法检测G6PD基因突变的研究，取得了本地区G6PD基因突变谱的第一手资料。

　　本次筛查得到G6PD缺乏症的基因突变发生率为18.8%（1205/6389），其中男女发生率分别为27.8%（512/1845）和14.7（668/4544）。在酶活性法认定的5280例阴性样本中，男性阴性样本为1331例，女性阴性样本为3949例，酶学法筛查的阴性样本中发现有基因突变的总百分比为1.8%（96/5280）,其中男女性样本漏筛率分别为0.3%（3/1331）和2.4%（93/3949），由此可看出女性更容易漏筛。共检出25种基因突变，其中检出率较高的有：G1376T–35.1%（423/1205），G1388A-32.3%（390/1205），A95G-11%（133/1205），G961A-6（72/1205），G482T-3.7%（45/1205），C1114T-3.7%（45/1205），C1450T-1%（12/1205），C607C-0.7%（9/1205），C1094A-0.3%（4/1205）。

　　本项研究属深圳市范围内最大样本数量的系统性G6PD基因突变筛查研究，研究获得了明确的深圳地区常见的G6PD基因突变谱。并且发现酶活性法筛查G6PD缺乏症，漏筛率大概在1.8%左右（96/5280），其中男女性样本漏筛率分别为0.3%（3/1331）和2.4%（93/3949），存在较高比例的漏筛率是出生缺陷干预的一大隐患，同时提示现行的酶学法筛查需要进一步优化。研究结果首次在大样本筛查基础上明确了深圳地区的G6PD缺乏症基因突变谱，为研发适合本地区出生缺陷预防的G6PD缺乏症精准筛查试剂盒奠定了基础。

　　市健研中心实验室 吴群燕